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Monday 15 june 1 15 /06 /Jun 08:47

Centro de Estudios Tecnológicos industrial y de servicios No. 100

 

Análisis y tecnología de alimentos.

 

 

Métodos de conservación del alimento y seleccionar el envase acorde a las características del alimento.

 

 

Reporte de la practica No. 4

 

Integrantes del equipo:

Rossman Antonio García Leal

Emmanuel Muñoz Cazola

Pedro Enrique Sánchez Sainez

Francisco Javier Inzunza Torres

Javier Villarreal Castellón

 

Profesora:

Damaris Eunice Dávalos Flores

Fecha de entrega:

15 de Junio del 2009


 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Práctica numero # 4

Parte I

Esterilización

Objetivo: esterilizar material con calor húmedo


Introducción:

El calor húmedo destruye los microorganismos por coagulación de sus proteínas celulares.

El principal método de esterilización que emplea calor húmedo es la esterilización por vapor a presión.

Existen otros métodos de descontaminación que emplean este tipo de calor los cuales, aunque no permiten la destrucción total de los microorganismos, disminuyen la carga microbiana que posee un material.

Entre estos métodos podemos citar:

_ Tindalización (esterilización fraccionada)

_ Agua hirviendo

_ Pasteurización

_ Olla de presión

 

Esterilización por vapor a presión

La esterilización por vapor a presión se lleva a cabo en un autoclave. Estos equipos emplean vapor de agua saturado, a una presión de 15 libras lo que permite que la cámara alcance una temperatura de 121ºC. El tiempo de esterilización usualmente es de 15 minutos, sin embargo, en algunas oportunidades, dadas las características del material, es necesario variar el tiempo de esterilización.

FUNDAMENTO

Al aplicar a un determinado material vapor de agua a una presión de 15 lb (121ºC)

por un tiempo determinado, se produce la destrucción total de los microorganismos

viables presentes en el mismo.


PARTE I.- PREPARACION DEL MATERIAL

 

MATERIAL:

·        2 cajas de petri

·        2 pipetas

·        1 matraz erlenmeyer

·        Papel estraza

·        Cinta masking     

·        Autoclave

PREPARACIÓN

A)    Lava y seca tu material

B)    Introduce 300 ml. De agua en el matraz erlenmeyer de 500 ml. Tapa con la rosca de modo que no tenga un cerrado hermético ni que quede la tapa suelta.

C)    Envuelve la tapa de petri

D)    Envuelve la pipeta

E)     Prepara el medio de cultivo como indica la etiqueta del medio

F)     Etiqueta tu material (no. Equipo, grupo y fecha)

 

 

 


 

 

 

 

 

 

 

 

Practica # 4

PARTE II

a)     Esterilización de material limpio ( con calor húmedo)

b)     Preparación y esterilización de medios

c)     Esterilización de desechos biológicos

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Esterilización de material limpio (con calor húmedo)

 

Material

·        1 matraz erelenmeyer

·        3 tubos de ensayo

·        4 pipetas

·        12 tubitos con tapón

·        12 campanas

·        4 cajas de petri

·        Aluminio

·        1 mechero

·        Alcohol

·        Cinta

·        Algodón

·        Etiquetas

·        Caldo lauril sulfato triptosa

·        Solución agar rojo

 

En esta parte de la practica, lo que nuestro equipo realizo, primeramente fue solicitar el material, posteriormente cada integrante de nuestro equipo tomo el material solicitado para llevarlo a lavar. Después de haberlo lavado se procedió a secar y envolver en papel de estraza para llevarlo al autoclave y asi proceder a la esterilización. Después de 15 minutos se retiro el material del autoclave y se traslado a nuestra mesa que previamente fue aseada y esterilizada con algodón y alcohol. Ya que el material se encontraba en la mesa se empezo a realizar la practica en la cual preparamos los medios de cultivo.

Preparación de medios de cultivo:

El medio de cultivo se prepara de acuerdo a las indicaciones que vienen al reverso del recipiente del medio. Es importante tomar las medidas de seguridad necesarias para evitar un percance.

Para el medio de cultivos se tiene que hacer un calculo del total de medio que utilizamos.

 

ESTERILIZACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

 

1.      Trasladar los medios de cultivos preparados.

2.      Colocar los medios de cultivo dentro del autoclave, el material debe colocarse correctamente dentro del equipo para que permita la correcta distribución del vapor de agua. Para ello se deben tomar las siguientes precauciones:

-Distribuir el material en forma ordenada en toda la superficie interna disponible.

-Evitar amontonar el material en un área especifica. No colocar el material uno sobre otro.

-Evitar que el material toque las paredes del autoclave.

-No preparar cestas con tubos donde estos se encuentren demasiado apretados.

3.      Colocar la ampolla del indicador biológico en el lugar que se considere mas difícil que llegue el vapor.

4.      Esperar que se alcancen los 120° y comenzar a contar el tiempo de esterilización.

5.      Cuando termine el tiempo de esterilización, apagar el autoclave.

6.      Esperar que bajen la presión y la temperatura del equipo para abrirlo y retiras los medios de cultivo.

7.      Retirar el indicador biológico e incubarlo bajo las condiciones que señale el fabricante.

8.      Esperar que el material alcance la temperatura ambiente antes de almacenarlo.

9.      Después del periodo de incubación observar las características del indicador biológico.

 

Esterilización de desechos biológicos

Comenzamos con el conteo del número de colonias en los cultivos que antes se habían hecho de coliformes totales en las cajas de petri y de mesofílicos aerobios en los tubos con campanas de fermentación, previamente esterilizando el área en la que íbamos a trabajar.

Después de hacerse y anotar el número de colonias formadas, se procedió a envolver con la tapa boca arriba de las cajas de petri y los tubos dentro de un recipiente con papel de estraza y se introdujeron en el autoclave para cambiar su estado de sólido a líquido de los cultivos y esterilizarlos.

Esperamos como unos 45 minutos a poderlos retirar del autoclave, y de ahí se procedió a verterlos en un contenedor de basura orgánica especial rápidamente antes de que se volvieran a solidificar los medios de cultivo. Se lavó todo el material utilizado y se dejo para poder guardarse.   

 

 

Observaciones:

Cuando estábamos elaborando la practica de esterilización notamos que se tiene que tener mucho cuidado a la hora de colocar el material en el autoclave ya que debe de estar perfectamente cubierto con el papel estraza para que quede totalmente estéril y libre de microorganismos y esporas.

También teníamos que estar regulando el autoclave para que se desarrollara bien la esterilización

Cuando el material salió del autoclave ya no lo podíamos abrir en cualquier lugar porque se contaminaría otra ves, es por eso que se preparó un área aséptica para evitar posibles contactos con microorganismos

Para manejar el material estéril es necesario que cada uno de los integrantes del equipo este completamente desinfectado, por eso hay que lavarse las manos con agua y jabón, después tomar un poco de alcohol y ponerse en las manos para concluir con la esterilización de las manos y poder manejar el material 

 

Resultados:

Al realizar la práctica número 4 “esterilización” aprendimos la técnica adecuada para tener un material libre de microorganismos, un material estéril, y en consecuencia de realizar esta técnica obtuvimos:

2 cajas de petri, 2 pipetas y una matraz con 300 ml. de agua, todo este material totalmente estéril.

Obtuvimos medios estériles

Al finalizar obtuvimos desechos biológicos estériles 

 

 

 

También obtuvimos lo siguiente:

Que Cuando se utiliza este método de esterilización por calor húmedo es importante

Controlar en el autoclave la relación entre la temperatura, la presión y el tiempo de exposición, ya que éstos son factores críticos en el proceso. Sólo cuando el vapor se coloca bajo presión, es cuando su temperatura aumenta por encima de los 100ºC  y esto permite alcanzar las temperaturas

 

           

de esterilización (121ºC).

Las Ventajas de utilizar este método.

 Entre las ventajas de este método de esterilización tenemos que no deja residuos, los autoclaves modernos son sencillos de manejar y es un método rápido de esterilización. Éste es el método de elección para esterilizar materiales termoestables y no sensibles a

la humedad como medios de cultivo, cultivos de microorganismos para descartar, lencería, uniformes, instrumentos quirúrgicos, etc. Entre sus desventajas están que no permite la esterilización de materiales sensibles al calor y materiales no miscibles con el agua como es el caso de polvos, aceites y grasas.

 

 

Las Medidas de precaución

_ Antes de comenzar el proceso de esterilización es necesario remover todo el

aire de la cámara del autoclave, porque de lo contrario no se podrán alcanzar

las condiciones de esterilización requeridas debido a que la cámara interna del

equipo no podrá ser saturada por el vapor de agua.

_ El tiempo de esterilización se debe comenzar a contar una vez que se han alcanzado

los 121ºC en la cámara interna del autoclave.

_ Si se van a esterilizar materiales tales como instrumentos quirúrgicos, equipos,

etc. no se deben cubrir con materiales impermeables al agua como por ejemplo

el papel de aluminio, porque éste no permite que el vapor tenga acceso al material

y por lo tanto no se logrará la esterilización.

_ Cuando se coloca el material a esterilizar en el interior del equipo se debe garantizar

la libre circulación del vapor de agua alrededor de todo el material.

Para controlar la esterilización por vapor a presión se emplean indicadores físicos

tales como medidores de presión, termómetros, o termógrafos. Aunque estos

controles son ampliamente utilizados, actualmente se consideran métodos secundarios para el control del proceso y son los indicadores biológicos los que permiten

determinar si realmente se llevó a cabo en forma efectiva la esterilización.

Entre los indicadores biológicos más utilizados para controlar el proceso de esterilización

por vapor a presión, se encuentran las esporas de Bacillus stearothermophilus

que son altamente resistentes a este proceso.

Se recomienda el uso de controles biológicos por lo menos una vez a la semana

par darios para el control del proceso y son los indicadores biológicos los que permiten

determinar si realmente se llevó a cabo en forma efectiva la esterilización.

Entre los indicadores biológicos más utilizados para controlar el proceso de esterilización

por vapor a presión, se encuentran las esporas de Bacillus stearothermophilus

que son altamente resistentes a este proceso.

Se recomienda el uso de controles biológicos por lo menos una vez a la semana

para verificar el buen funcionamiento del autoclave. En caso de que se sospeche

de alguna falla se debe colocar un indicador biológico en cada carga de esterilización.

a verificar el buen funcionamiento del autoclave. En caso de que se sospeche

de alguna falla se debe colocar un indicador biológico en cada carga de esterilización.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Conclusiones:

 

El proceso de esterilización por calor húmedo se utiliza para la destrucción de microorganismos, sean cuales sena sus propiedades y sus características.

Para la realización de la esterilización por calor húmedo se necesita un autoclave que es un aparato provisto de una llave y manómetro para regular la presión y temperatura que deseemos utilizar.

El vapor provisto dentro del autoclave por si solo no es esterilizante se somete en el interior a una presión mayor que la atmosférica, que aumenta la temperatura del vapor, siendo de esta forma como se consigue la destrucción de todos los microorganismos. Este vapor saturado debe estar sometido a una temperatura determinada y durante un tiempo necesario.

Los resultados que obtuvimos fueron existosos, el objetivo a realizar se cumplió, el cual era dejar  los materiales que utilizaríamos para el cultivo de microorganismos libres de cualquier agente no deseado.

 

 


Por LOS DIVINOS
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